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腺病毒
來源：萬物 發(fā)布時間：2021-08-31
腺病毒質粒系統(tǒng)概述
腺病毒是一類中等大小、無包膜的雙鏈DNA病毒，已知可導致人類輕度至重度呼吸道疾病。腺病毒在研究中的優(yōu)勢包括它們的大包裝容量(>8 kb)、高滴度和高水平的轉基因表達。此外，這些病毒能夠以幾乎100%的效率靶向廣泛的分裂和非分裂細胞類型。不像慢病毒某人逆轉錄酶病毒，腺病毒不會整合到宿主基因組中。腺病毒的缺點包括短暫的轉基因表達，以及由病毒衣殼誘導的實質性免疫反應。
腺病毒可以通過幾種方法產(chǎn)生，其中最常見的涉及腺病毒質粒在哺乳動物細胞或微生物(包括細菌和酵母)中的同源重組。兩個質粒，稱為穿梭質粒和腺病毒(也稱為骨架)質粒，被重組到一個包含兩個質粒序列的DNA分子中。然后可以將這種DNA分子轉染到哺乳動物包裝細胞系中，產(chǎn)生腺病毒顆粒。。
腺病毒成分
腺病毒基因組是一個線性的36Kb雙鏈DNA (dsDNA)分子，包含多個重剪接轉錄物?；蚪M的兩端是我已轉換terminal repeats (ITRs)?；蚍譃樵缙?/span>(E1-4)和晚期(L1-5)轉錄本。有57種可接受的人腺病毒類型，大多數(shù)腺病毒載體基于Ad5。基于Ad5的載體使用柯薩奇-腺病毒受體(CAR)進入細胞。
重組腺病毒刪除了兩個基因:E1和E3。E1由腺病毒包裝線293或911；它從病毒載體中的缺失使病毒復制能力下降。E3參與逃避宿主免疫，并不是病毒產(chǎn)生的關鍵。這兩個成分的缺失導致轉基因包裝容量為>8 Kb。構建體包含左右臂，以促進轉基因同源重組到腺病毒質粒中。
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